微生物限度薄膜過濾法操作流程

1.取相當于每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數(shù)較多時，可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同“計數(shù)方法的驗證"。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。
2.陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml，照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。

　　3.培養(yǎng)和計數(shù) 除另有規(guī)定外，細菌培養(yǎng)48小時，逐日點計菌落數(shù)，一般以48小時的菌落數(shù)報告;霉菌、酵母菌培養(yǎng)72小時，逐日點計菌落數(shù)，一般以72小時的菌落數(shù)報告;必要時，可適當延長培養(yǎng)時間至5～7天進行菌落計數(shù)并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數(shù)。點計菌落數(shù)后，計算各稀釋級供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報告規(guī)則報告菌數(shù)。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數(shù)不少于15，則兩個平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。

　　4.菌數(shù)報告原則 以相當于1g或1ml供試品的菌落數(shù)報告菌數(shù);若濾膜上無菌落生長，以<1報告菌數(shù)(每張濾膜過濾1g或1ml供試品)，或<1乘以稀釋倍數(shù)的值報告菌數(shù)。

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