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菌種恒溫恒濕培養(yǎng)箱:也稱種子制備,意思是指菌種在一定條件下,經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。菌種的培養(yǎng)我們可以選擇恒溫恒濕培養(yǎng)箱,來(lái)達(dá)到溫度和濕度在一臺(tái)機(jī)器上就可以完成,不需要購(gòu)買兩臺(tái)或以上。
保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無(wú)菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在恒溫恒濕培養(yǎng)箱中25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長(zhǎng)時(shí)間)。恒溫恒濕培養(yǎng)箱所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子,對(duì)于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基。將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。
然后將成熟的扁瓶孢子于真空干燥箱真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入4℃冰箱中備用。
一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。放線菌孢子的培養(yǎng)基大多是采用豌豆浸出液、牛肉膏及無(wú)機(jī)鹽與瓊脂制成的。將斜面孢子接入擴(kuò)大的扁瓶孢子培養(yǎng)基中,于28~37℃恒溫恒濕培養(yǎng)箱培養(yǎng)5~14天。