組織研磨機(jī)的典型應(yīng)用領(lǐng)域介紹

典型應(yīng)用領(lǐng)域介紹

廣泛應(yīng)用于：分子標(biāo)記輔助育種、基因組學(xué)、系統(tǒng)生物學(xué)和分子進(jìn)化、轉(zhuǎn)基因研究等生物化學(xué)研究領(lǐng)域植物組織核酸提取。

分離完整種子中的核酸，需先用機(jī)械方法破碎種子，再提取和純化核酸。通常的機(jī)械破碎方法速度很慢而且易導(dǎo)致交叉污染，不適合高通量的種子破碎。

用GENO 對(duì)微孔板中的種子進(jìn)行研磨，可從種子細(xì)胞中快速釋放出大量核酸；再?gòu)膭驖{液中分離純化出核酸。例如：用水浸泡過(guò)夜大豆，3 分鐘內(nèi)被均質(zhì)化成漿液，用于DNA 分析的材料來(lái)源。

從培養(yǎng)細(xì)胞中快速提取基因組D N A為P C R 分析做準(zhǔn)備

PCR 技術(shù)提高了核酸檢測(cè)和定量測(cè)序效率。但在模板擴(kuò)增前需要一個(gè)包括細(xì)胞收集和核酸溶解純化的步驟，過(guò)程緩慢。然后用層析樹脂把核酸從裂解液中分離出來(lái)。需要耗費(fèi)大量時(shí)間和昂貴的材料。

GENO 技術(shù)快速破碎大量培養(yǎng)細(xì)胞，為后期基因組DNA 進(jìn)行PCR 分析做準(zhǔn)備。GENO 對(duì)微孔板中大量培養(yǎng)細(xì)胞，進(jìn)行高通量均質(zhì)化處理，再通過(guò)層析樹脂對(duì)核酸進(jìn)行純化，從而進(jìn)行PCR 分析，大大提高基因組分析的效率。

Yeast 酵母的9 6 孔高通量破碎

酵母已成為基因表達(dá)研究和蛋白質(zhì)重組表達(dá)的通用宿主，成為生物系統(tǒng)研究模式型生物，成為生物藥學(xué)家的有力工具。包括Picbia、Hansenula、Debaryomyces 均被研究者所使用，如Saccbatomyces 酵母。酵母mRNA 和細(xì)胞內(nèi)蛋白，很難用傳統(tǒng)酶解方法提取。裂解酶中通常含有核糖核酸酶和其他蛋白，它們不僅會(huì)攻擊細(xì)胞壁，而且會(huì)攻擊特定分子。并且，酶解產(chǎn)生的原生質(zhì)體，需借助特定的試劑進(jìn)行溶解，而導(dǎo)致很多蛋白質(zhì)變性失活。

通常的壓榨或球磨方式，只能在單樣品下破碎酵母細(xì)胞，釋放其內(nèi)溶物，操作效率太低。GENO 專為那些需要大量酵母克隆進(jìn)行高通量篩選檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)，設(shè)計(jì)了破碎種子的深孔板，在深孔板中對(duì)酵母進(jìn)行破碎。實(shí)現(xiàn)高通量地分裂細(xì)胞。

細(xì)菌細(xì)胞的裂解（嗜鹽菌和桿菌）Bacterial Cells

GENO 借助碰撞，裂解細(xì)菌細(xì)胞。以格蘭氏陰性耐鹽菌Halomonas elongate 和格蘭氏陽(yáng)性桿菌為模式的研究對(duì)象，SPEX 發(fā)展了兩種相應(yīng)技術(shù):1）細(xì)菌培養(yǎng)，收獲并沖洗掉多余的培養(yǎng)基，將細(xì)胞懸浮于深孔板的鹽水溶液中，2）GENO 可借助研磨介質(zhì)， 進(jìn)行細(xì)胞振蕩破碎，6-9 分鐘就釋放出足夠量的核酸，進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

QuEChERS 方法

Geno/Grinder 研磨儀可用于QuEChERS 方法中的樣品處理步驟，可以用Geno研磨儀進(jìn)行水果、蔬菜植物組織的均質(zhì)化，從而更高效、快速的研磨處理樣品，為后續(xù)的LC/MS/MS 方法測(cè)試殘留農(nóng)藥做準(zhǔn)備。可以在室溫下均質(zhì)化或者配合Kryo-Tech 冷凍裝置使用，為了消除交叉污染需要添加QuEChERS 試劑。

目前，美國(guó)FDA 食品藥品管理局和美國(guó)環(huán)保局EPA均采用Geno 研磨儀作為標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備進(jìn)行水果、蔬菜植物組織的均質(zhì)化處理。

根據(jù)美國(guó)環(huán)保署U S E P A 和食品藥物管理局U S F D A， L C / M S / MS 測(cè)試食品殘留農(nóng)藥，樣品處理采用不同方法之比較說(shuō)明

采用GENO/Grinder 萃取器來(lái)增快殘留農(nóng)藥， 霜脲氰(Cymoxanil)，的LC/MS/MS 分析之樣品處理，其產(chǎn)能達(dá)到一般方法三倍、杜邦方法兩倍數(shù)量的樣品，大大節(jié)省時(shí)間人力成本的耗費(fèi)。回收率(SPIKERECOVERY) 和其他QA/QC 的效果一致。