索氏抽提法提取粗脂肪適用于脂類(lèi)含量較高,結合態(tài)的脂類(lèi)含量較少,能烘干磨細,不易吸濕結塊的樣品。
特點(diǎn):操作簡(jiǎn)單,易提取,實(shí)驗結果容易計算。
索氏抽提法,用于粗脂肪含量的測定。脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實(shí)中,測定脂肪的含量,可以作為鑒別其品質(zhì)優(yōu)劣的一個(gè)指標。脂肪含量的測定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。目前國內外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是*的經(jīng)典方法,也是我國糧油分折的標準方法。
實(shí)驗原理
采用索氏抽提法中的殘余法,即用低沸點(diǎn)有機溶劑(或石油醚)回流抽提,除去樣品中的粗脂肪,以樣品與殘渣重量之差,計算粗脂肪含量。由于有機溶劑的抽提物中除脂肪外,還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類(lèi)脂物質(zhì),因而抽提法測定的結果只能是粗脂肪。
實(shí)驗材料
油料作物種子、中速濾紙
儀器裝置
?。?)索氏脂肪抽提器或JT-SXT-06型油分測定器
?。?)干燥器(直徑15~18cm,盛變色硅膠)
?。?)不銹鋼鑷子(長(cháng)20cm)
?。?)培養皿
?。?)分析天平(感量0.001g)
?。?)稱(chēng)量瓶
?。?)恒溫水浴
?。?)烘箱
?。?)樣品篩(60目)
試劑
或低沸點(diǎn)石油醚(A.R.)
實(shí)驗步驟
?。?)切片
將濾紙切成8cm×8cm,疊成一邊不封口的紙包,用硬鉛筆編寫(xiě)順序號,按順序排列在培養皿中。將盛有濾紙包的培養皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷卻至室溫。按順序將各濾紙包放人同一稱(chēng)量瓶中稱(chēng)重(記作a)、稱(chēng)量時(shí)室內相對濕度低于70%。
?。?)包裝干燥
在上述已稱(chēng)重的濾紙包中裝入3g左右研細的樣品,封好包口,放入105±2℃的烘箱中干燥3h,移至干燥器中冷卻至室溫。按順序號依次放入稱(chēng)量瓶中稱(chēng)重(記作b)。
?。?)抽提
將裝有樣品的濾紙包用長(cháng)鑷子放入抽提筒中,注入一次虹吸量的1.67倍的A.R.使樣品包浸沒(méi)在A.R.中。連接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒溫水浴中進(jìn)行抽提,調節水溫在70~80℃之間,使冷凝下滴的A.R.成連珠狀(120~150滴/min或回流7次/h以上),抽提至抽取筒內的A.R.用濾紙點(diǎn)滴檢查無(wú)油跡為止(約需6~12h)。抽提完畢后,用長(cháng)鑷子取出濾紙包,在通風(fēng)處使A.R.揮發(fā)(抽提室溫以12~25℃為宜)。提取瓶中的A.R.另行回收。
?。?)稱(chēng)重
待A.R.揮發(fā)之后,將濾紙包置于105±2℃烘箱中干燥2h,放入干燥器冷卻至恒重為止(記作c)。
計算結果
粗脂肪含量(%)=( b-c)/(b-a) ×100
式中:a:稱(chēng)量瓶加濾紙包重(g)
b:稱(chēng)量瓶加濾紙包和烘干樣重(g)
c:稱(chēng)量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘渣重(g)