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氣體是哺乳動物細胞培養(yǎng)生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環(huán),產生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。開放培養(yǎng)時一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環(huán)境中。CO2既是細胞代謝產物,也是細胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)液的pH有直接關系。動物細胞多數(shù)需要微堿性環(huán)境,pH為7.2~7.4,以不超出6.8~7.6為宜。在細胞培養(yǎng)過程中,隨著CO2釋放量的增多,培養(yǎng)基會變酸,因此常在培養(yǎng)基中加入NaHCO3(與CO2溶于水后所形成的H2CO3構成一個緩沖對)來調節(jié)pH。NaHCO3具有釋放CO2的傾向,加入CO2可以抑制這個反應的進行。培養(yǎng)箱中CO2濃度應與培養(yǎng)液中NaHCO3濃度相平衡,如果培養(yǎng)箱中CO2濃度設定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量應為1.97 g/L;如果CO2濃度維持在10%,則NaHCO3的加入量應為3.95 g/L。 控制二氧化碳濃度,這就是為什么二氧化碳培養(yǎng)箱成為細胞或組織體外培養(yǎng)環(huán)境*的重要原因。